小鼠elisa試劑盒的四種測(cè)試方法,快來(lái)看看吧!
2021-10-14
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小鼠elisa試劑盒基本原理是在測(cè)定時(shí),受檢樣本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與溶液中的其他物質(zhì)分開(kāi),再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)結(jié)合在固相載體上,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中要檢測(cè)的目標(biāo)物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
小鼠elisa試劑盒的測(cè)試方法主要分為四種:
1)直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一抗,即可測(cè)定抗原總量。此法操作手續(xù)簡(jiǎn)短,因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
2)間接法:間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)來(lái)檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
3)雙抗體夾心法:針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測(cè)抗體。適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子,不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原。同理,也有雙抗原夾心法測(cè)抗體。
4)競(jìng)爭(zhēng)法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。
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